A preliminary understanding of plasmids

对质粒的初步了解

细菌质粒DNA(pDNA)通常是一种较小的(平均80kb)环状染色体外DNA元素,其以游离形式持续稳定地存在于染色体外,能够通过招募宿主细胞机制进行半自主复制,并可携带帮助宿主适应新环境的基因或编码特定功能的基因。

了解质粒

 

A preliminary understanding of plasmids

质粒是附着在细胞上的较小的非细胞染色体或核 DNA 分子,能够自主复制(即细胞外质粒、细胞外质体)。虽然大多数质粒呈环状结构,但它们存在于许多细菌和酵母中,以及植物的叶绿体和线粒体等细胞器中。然而,1984 年,在放线菌(如天蓝色链霉菌)和原核生物(如赫氏疏螺旋体)中发现了线状质粒。
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百伦蛋白及质粒生产工艺设备

天然质粒的DNA长度从几千个碱基对到几十万个碱基对不等。质粒天然存在于这些生物体中,有时一个细胞中可以同时存在一个甚至几个质粒。质粒的拷贝数在一个细胞中可以从单个到几千个不等。有时一些质粒含有某种抗性基因(例如大肠杆菌中含有一种含有抗四环素基因的质粒)。一些质粒携带的基因可以赋予细胞额外的生理和代谢能力,甚至在某些细菌中改善其致病性。一般而言,质粒的存在与否对宿主细胞的存活不起决定性作用。它是遗传工程最常见的载体。
质粒的分类
  •  根据质粒能否通过细菌的相互作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。
  •  根据质粒在细菌内复制的类型,可分为严格控制型和放松控制型。
  •  根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。
  •  根据宿主细胞的基因和特性,可分为以下六种不同类型

1.耐药质粒

它们携带耐药基因,使宿主细菌对某些抗菌药物产生耐药性,如苄氨基青霉素、氯霉素等。不同的细菌也可以含有相同的耐药质粒,如RP4质粒,存在于假单胞菌和其他细菌中。R质粒也可以以感染的形式在不同种类的细菌中传播。

2.生育因素

遗传物质可通过接合作用在供体与受体之间传递。F因子的约1/3 DNA构成转移DNA的操纵子,约35个基因负责伞毛的合成和组装。这是DNA转移的区域,受traJ基因产物正调控。它还具有重组区和复制区。重组区含有多个插入序列,通过这些序列进行同源重组。复制区有两个复制起始点:一个是OriV,供F因子在宿主体内自主复制时使用;另一个是OriT,它是接合时滚环复制的起点。

3.Col质粒

携带编码大肠杆菌素的基因。大肠杆菌可以杀死其他细菌。

4.降解质粒

该质粒编码一种特殊的蛋白质,使宿主细菌能够代谢特殊的分子,例如甲苯或水杨酸。

5.侵入性质粒

这些质粒使宿主细菌具有致病能力。例如,Ti质粒是在农杆菌中发现的,现在已被加工成植物转基因的常用载体。

6.隐蔽质粒

它不表现出任何表现类型,主要通过物理方法发现。(例如酵母2μm质粒)

质粒在基因治疗领域的优势

(1)在基因转移过程中,质粒载体具有毒性低、免疫原性低、能耐受核酸酶、转移效率与遗传物质的大小无关等优点;(2)在基因编辑中,质粒可以作为CRISPR/Cas9系统表达载体的编辑工具和基因修复序列的供体。A preliminary understanding of plasmids3

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